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检测灵敏度

发布时间: 2022-07-29  点击次数: 805次

定义“超灵敏"
对传统的ELISAz强烈的要求是具有超灵敏检测的能力。然而,“超灵敏"一词经常被曲解。其中一个原因是与聚合酶链式反应(PCR)的检测限(LOD)进行了比较。聚合酶链式反应可以扩增核酸,从而检测出少量的DNA或RNA拷贝数。例如,实时PRC的LOD是各种核酸的几个拷贝数/检测。然而,实时PCR和蛋白质检测系统之间的LOD无法进行比较,"超灵敏 "一词用于蛋白质定量是不准确的。
误解 "超灵敏 "的第二个原因是源于在其他各种蛋白质检测方法中对LOD的比较。如上所述,许多技术可以用来量化目标蛋白,包括ELISA、LC-MS和芯片实验室方法。而z低的方法可能被认为是'超灵敏'的方法,优于其他方法,但这是不合适的,因为仅仅根据检测限来比较方法,而不考虑对特殊仪器或特殊房间的需求以及成本,是没有用的。也就是说,"超灵敏 "这个词并不意味着一个具体的数值。那么什么是 "超灵敏"?
澳大利亚新南威尔士大学的J. Justin Gooding最近详细讨论了这个问题。化学家和生物学家对 "超灵敏"一词的使用是不同的。为了以跨学科的方式定义该术语,他将超灵敏生物分析传感器定义为 "具有足够灵敏度和低背景的生物传感器,可以达到亚皮摩尔检测极限"。他还解释说,"这是灵敏度的含义在化学和生物学之间的折中,承认检测限的化学意义与灵敏度之间的联系,因为它与背景信号有关"。10-13摩尔/升或更小的检出限可以被称为"超灵敏"检测。如果我们使用96孔微孔板进行ELISA,一次测定体积一般等于100μL。因此,10-13摩尔/升相当于10-17摩尔/次,这可能很难实现。

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