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实现超灵敏诊断的改良ELISA法的新进展
数字化ELISA
数字ELISA是大约10年前作为一种超灵敏的检测技术发展起来的。当在毫微微升大小的微孔阵列中实现酶反应时,在非常低的目标浓度下可以检测到累积的产物,从而实现单分子检测。利用ELISA检测到甲型流感病毒重组核蛋白的毫微摩尔浓度。应用带有胶体金的双功能荧光磁性纳米球(AuNPs)建立了检测Q流感病毒的ELISA。该方法的检出限为7.8fg/mL。已经被描述为数字化ELISA。
Akama及其同事开发了一种由数字ELISA修改的高灵敏度检测方法,该方法没有清洗和信号扩增,他们称之为数字均匀非酶免疫吸附试验。该方法检测到前列腺特异性抗原的含量为0.093 pg/mL,而商业化的高灵敏ELISA检测到0.84pg/mL,数字化ELISA检测到0.055 pg/mL。