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奥瑞达生物给您讲解ELISA试验检测的质量分析

发布时间: 2024-04-09  点击次数: 690次

ELISA方法现在已经被广泛的应用于各种抗原和抗体测定。抛开试剂盒本身质量外,我们在实验中也有很多因素都会影响试验的正常结果。其中最常出现的问题是显色淡,灵敏度偏低、重复性不佳、假阳性结果和假阴性结果,不管出现什么样的结果都会直接影响我们的实验结果。下面来分析ELISA实验非正常检测结果产生的常见原因,并分析其解决办法,以提高检测质量。

1、方法学的影响

ELISA 测定模式包括以下几种: 双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、IgM 抗体捕捉法、竞争抑制法, 其中竞争抑制法因受操作时差所引起的竞争等因素的影响, 结果重复性较差, 质量较难控制。

2、试剂因素

试剂的选择 检测的原理均基于抗原抗体反应。由于该反应过程受多种因素的影响, 如普遍存在基质效应、交叉反应等, 因而检测结果难以溯源, 不同方法、不同试剂之间甚至同一试剂不同批号间结果均缺乏可比性。试剂质量在很大程度上决定了检测的水平, 因此在引入新项目之前必须对试剂进行严格的评估。试剂的评估有以下几个步骤: (1) 确定开展该项目的必要性; (2) 了解该项目现有的检测方法和原理; (3) 在了解试剂的组成基础上选择多家试剂盒进行比较,判断标准参考方法或参考物质, 其次为临床的满意度及机构的报告如各级室间质量评价、CDC 报告等; (4) 定期对检测结果进行追踪反馈直至最终认可该试剂。

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