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奥瑞达生物浅谈如何区分双抗夹心法、间接法和竞争法

发布时间: 2022-10-28  点击次数: 986次

近年来,ELISA试剂盒以灵敏度较高、特异性较好的特点得到了广泛的应用,ELISA试剂盒根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,又分为双抗夹心法、间接法、竞争法等几种类型。

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那么,这几种类型分别应用于哪些实验?这些类型的优缺点又是什么呢?请继续往下看!

双抗体夹心法测抗原:双抗体夹心法是检测抗原常用的方法,适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。

双抗原夹心法测抗体:反应模式与双抗体夹心法类似。用特异性抗原进行包被和制备酶结合物,以检测相应的抗体。与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体。此法中受检标本不需稀释,可直接用于测定,因此其敏感度相对高于间接法。乙肝标志物中抗HBs的检测常采用本法。本法关键在于酶标抗原的制备,应根据抗原结构的不同,寻找合适的标记方法。


间接法:是检测抗体常用的方法,本法主要用于对病原体抗体的检测而进行传染病的诊断。 

竞争法测抗体:当抗原材料中的干扰物质不易除去,或不易得到足够的纯化抗原时,可用此法检测特异性抗体。其原理为标本中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与固相抗原结合。抗HBe的检测一般采用此法。 


竞争法测抗原:小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点,因此不能用双抗体夹心法进行测定,可以采用竞争法模式。其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多,结合在固相上的酶标抗原愈少,最后的显色也愈浅。小分子激素、药物等ELISA测定多用此法。


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