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ELISA试剂盒包装和封闭要素

发布时间: 2022-09-21  点击次数: 578次

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包被用抗原或抗体的浓度,包被的温度和时间,包被液的pH等应根据试验的特点和材料的性质而选定。通常在ELISA试剂盒板孔中加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置过夜,37℃中保温2小时被以为具有平等的包被效果。特别是用单抗腹水直接包被时,因其中大量非抗体蛋白在包被时同样也吸附在固相表面,业已起到了类似封SUO剂的作用。并非所有的ELISA固相均需封SUO,封SUO不当反而会使阴性本底增高。ELISA试剂盒脱脂奶粉也是一种良好的封SUO剂,其最大的特点是价廉,可以高浓度使用(5%)。抗体和蛋白质抗原一般采用pH9.6的碳酸盐缓冲液作为稀释液,也有用pH7.2的磷酸盐缓冲液及pH7~8的Tris-HCL缓冲液作为稀释液的。
高质量的速溶食用低脂奶粉即可直接当作封SUO剂使用,但因为奶粉的成份复杂,而且封SUO后的载体不易长期保留,因此在试剂盒的制备中较少应用。ELISA试剂盒封SUO的手续与包被相类似。一般说来,双抗体夹心法,只要酶标记物是高活性的,操纵时洗涤*,不经封SUO也可得到满足的结果。封SUO是否必要,取决于ELISA试剂盒的模式及详细的实验前提。

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